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基因编辑服务

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详细介绍Detailed Introduction

细胞基因编辑
1、技术简介
引导 RNA(sgRNA)引导 Cas9 蛋白识别靶位点,然后蛋白的 2个核酸内切酶结构域分别对 DNA的 2条单链进行特异性切割,由于细胞内的随机修复机制,在基因组上会随机引入插入、缺失、替换事件,从而造成基因编辑。
2、技术服务流程框架图
客户在线下单——订单/实验材料确认——靶点设计——基因编辑载体构建——瞬时转染哺乳动物细胞——抗生素筛选并测序——培养皿筛单克隆细胞并测序——96孔板筛单克隆细胞并测序--得到敲除目的基因的单克隆细胞系【实验周期约2个月】
 
3、主要细胞类型
 
4、实验结果

(1)基因编辑细胞系一份
(2)检测测序结果
(3)实验报告(实验操作流程、基因编辑细胞系生物信息学解读结果)

5、相关图片
(1)抗生素筛选后,在靶点处有多套峰,表明已有细胞敲除成功。
抗生素筛选敲除Icam5基因的293T细胞测序图
 
(2)用培养皿进行初筛,基本为双峰,保证后续挑的单克隆均已敲除。
 培养皿初筛敲除Icam5基因的293T细胞单克隆测序图
 
(3)将培养皿筛出的细胞再用96孔板筛单克隆细胞,保证得到的细胞为敲除了目的基因的单克隆细胞。
96孔板筛敲除Icam5基因的293T细胞单克隆测序图


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